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原位雜交是一種重要的實時定量PCR檢測方法

更新時間:2023-02-25 點(diǎn)擊量:2265
   原位雜交是一種重要的生物技術(shù)手段,主要利用DNA雙鏈分子和特異性Probe分子建立原位雜交反應(yīng),當(dāng)Probe分子靠近DNA雙鏈時,Probe分子上的特異性引物將在DNA雙鏈上的特異序列處引發(fā)雙鏈鏈接,從而形成一個叫做雜交的物料,然后利用特異的標(biāo)記物及檢測儀器,反映其存在與否及定量內(nèi)容。
 
  原位雜交是利用原位雜交儀將特異性的核酸直接定量地檢測到實時熒光發(fā)射,從而將基因表達(dá)水平空間化地進(jìn)行定量檢測,集成了變性/雜交、雜交、多步運(yùn)行三種操作模式,適用于各種原位雜交實驗,是一種重要的實時定量PCR檢測方法。
 
  儀器特點(diǎn):
 
 ?。?)敏感性高:非特異性污染非常低,可以檢測非常少量的mRNA、DNA等物質(zhì),具有很強(qiáng)的敏感性。
 
  (2)靈敏度高:由于具有單一分子靈敏度,比傳統(tǒng)的定量PCR方法更加靈敏,可以快速檢測微量物質(zhì)的變化情況。
 
 ?。?)節(jié)省時間:與傳統(tǒng)的PCR定量方法相比,原位雜交儀不需要建立分子生物學(xué)實驗,只需在準(zhǔn)備好的裝置上放置樣品和Probe,就可以節(jié)省大量的實驗時間。
 
 ?。?)精確度高:可以精確地測量和檢測具有特異性標(biāo)記或Probe物質(zhì)的變化,可以更準(zhǔn)確地定量和計算細(xì)胞內(nèi)的mRNA和DNA含量,確保定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 
 ?。?)高通量:在同一儀器上可以對多種不同的環(huán)境或細(xì)胞樣品進(jìn)行同步檢測,實現(xiàn)大量樣品、少量試驗、快速實驗,從而實現(xiàn)了高通量檢測和實驗效率。
 
  原位雜交儀作為一種重要的定量PCR方法,已深受臨床、醫(yī)學(xué)和生物學(xué)研究領(lǐng)域的青睞,在基因組學(xué)、藥物研發(fā)、新藥篩選等領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。它不僅可以對基因表達(dá)水平進(jìn)行定量檢測,而且可以檢測少量物質(zhì)的變化情況,更能夠精確地測量和計算DNA和mRNA的含量,具有非常重要的臨床研究價值。
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